本研究利用结合到BSA 上的 deltorphin Ⅰ肽(DADTⅠ)免疫Balb/c小鼠,成功地制备了特异性抗DADT Ⅰ单克隆抗体.交叉试验表明,所获抗体仅识别DADT Ⅰ和DADT Ⅱ而不识别其L型同分异构体LADT Ⅰ,也与其它DADT Ⅰ类似物无交叉反应.Epitope分析表明,该抗体识别DADT Ⅰ的N末端特异氨基酸序列,其中包括对其活性有重要影响的第二位的D-Alanine.利用这一抗体对成年大鼠脑组织和新生大鼠培养神经元进行了免疫组织化学研究.大鼠脑中有含量较低的DADT I样免疫活性,主要分布在某些特定部位的神经纤维和神经元胞体,如终纹床核、杏仁核、海马、伏核、下丘脑外侧区、黑质、中央灰质等部位.然而在培养的大鼠脑神经元,DADT I样免疫活性的含量却很丰富,神经元的胞体和突起均呈较强的DADT I样免疫活性.两项结果均提示哺乳动物脑神经元很可能产生一种与DADT I在结构上极其类似的物质. |