利用酵母双杂交技术筛选鉴定STCH与RanBP9的相互作用-神经解剖学杂志

利用酵母双杂交技术筛选鉴定STCH与RanBP9的相互作用

作者：吕立夏[1] 李学礼[1] 谷辉杰[2] 郑莉[2] 李静琪[1] 徐磊[1]

单位：同济大学医学院,基础医学院生物化学教研室,上海200092同济大学医学院,上海,200092

分类号：R3

出版年·卷·期（页码）：2008·24·第一期（1-1）

摘要：

以人应激和分子伴侣蛋白(STCH)为诱饵蛋白,利用酵母双杂交技术在高严格条件下筛选人脑cDNA文库.在SD/-4培养基上共获得156个阳性克隆,将酵母菌扩增后抽提质粒,转化大肠杆菌,进行序列分析,并经过回复杂交验证,潜在的与STCH相互作用的蛋白有:VDAC、MBP2、ZNF251、RanBP9、Phosophate glycolase、β-tubulin、up1、up2和WW adaptor蛋白.基于各候选蛋白与神经系统疾病的关系,选择RanBP9作进一步验证实验.经体外GST-Pulldown和体内免疫共沉淀实验证实RanBP9和STCH能够相互作用,明确RanBP9的羧基端为相互作用的最小功能域.此结果为我们进一步揭示STCH作用的分子机制提供了线索.

参考文献：

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